第十题,实验设计题。请同学们阅读一篇材料。 核酸限制性内切酶是重组DNA技术中最重要的工具酶之一,它是一类能识别双链DNA中特定碱基序列,内切方式水解DNA链的核酸水解酶。最适合基因工程操作的限制内切酶为第二类内切酶,这类酶的一个重要特点是切割的断裂点都在反转重复序列上,亦称回文式序列,如: EcoR I 5’-G↓AATT C-3’ 3’-C TTAA↑G-5’ BamH I …… 请设计一个质粒DNA的限制性内切酶酶解鉴定实验。 ‘还好我做过核酸的其他实验,这个核酸限制性内切酶的实验设计,编吧!’ 兰杰并没有亲手做过限制性内切酶的实验,他也很想做啊,然而限制内切酶是昂贵的生化试剂,教练不给他做。 这个时候,兰杰只能依靠类似实验的操作经历及丰富的理论知识储备,进行合理的编排。 第一步,酶切反应。 第二步,电泳凝胶板的制备。 第三步,电泳加样。 第四步,电泳与鉴定。 兰杰首先设计出四个主要的实验步骤。 需要的实验材料包括:质粒DNA、反应缓冲液、BSA、限制性内切酶…… 需要的实验器材包括:电泳槽与电泳仪、紫外检测仪、电热恒温水浴箱…… 然后就是细化每一个步骤,写出具体的实验操作细节。 ‘设计完了,理论上应该是可行的。’ 兰杰从头到尾检查一遍试卷,刚检查完,铃声响起,交卷。 明天将进行实验考试,雷天刚对他的队员们说:“理论考试自我感觉良...
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